簡要描述：堿性磷酸酶的活性檢測試劑盒，常用于檢測培養(yǎng)的成骨細(xì)胞、實驗動物血清和骨組織中的堿性磷酸酶活性。堿性磷酸酶（ALP）廣泛分布于肝臟、骨和小腸之中。組織中酶活性的變化是成骨等生理現(xiàn)象的重要標(biāo)志。在骨代謝研究領(lǐng)域被用作骨形成指標(biāo)之一。
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產(chǎn)品分類
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個月 |
|---|
LabAssay™ ALP 
LabAssay™ jian性磷酸酶檢測試劑盒
堿性磷酸酶的活性檢測試劑盒，常用于檢測培養(yǎng)的成骨細(xì)胞、實驗動物血清和骨組織中的堿性磷酸酶活性。
堿性磷酸酶（ALP）廣泛分布于肝臟、骨和小腸之中。組織中酶活性的變化是成骨等生理現(xiàn)象的重要標(biāo)志。在骨代謝研究領(lǐng)域被用作骨形成指標(biāo)之一。
本產(chǎn)品是以對硝基苯磷酸鹽為底物的jian性磷酸酶檢測試劑盒，通過使用酶標(biāo)儀進(jìn)行多樣品檢測。
◆檢測原理
堿性磷酸酶存在下，碳酸鹽緩沖溶液（pH 9.8）中的對硝基苯磷酸鹽分解成對硝基ben酚和磷酸，產(chǎn)生的對硝基ben酚在堿性條件下呈黃色。通過測量405 nm處的吸光度，可以計算樣品中的堿性磷酸酶活性。
◆產(chǎn)品性能
檢測范圍：>0.06 mmol/L
標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍：0.0625~0.5 mmol/L
重復(fù)性：C.V.<10%
檢測樣品：血清、血漿、培養(yǎng)上清
檢測對象：小鼠、大鼠、人、貓、狗
所需樣品量：20 μL
檢測時間：約20min
檢測波長：405 nm
◆試劑盒成分
底物片（溶解時對硝基苯基磷酸二鈉 6.7 mmol/L) | 10 片 |
底物溶解buffer （2.0 mmol/L 氯化鎂 含有 0.1 mol/L 碳酸鹽緩沖液 pH 9.8) | 50 mL × 1瓶 |
反應(yīng)終止液（0.2 mol/L氫氧化鈉溶液） | 50 mL × 1瓶 |
標(biāo)準(zhǔn)溶液 (0.5 mmol/L 對硝基ben酚溶液） | 5 mL × 1瓶 |
◆標(biāo)準(zhǔn)曲線示例
◆檢測操作方法
根據(jù)下表中的條件進(jìn)行反應(yīng)。
Test | 標(biāo)準(zhǔn) | 空白 | |
底物緩沖液 | 100 μL | 100 μL | 100 μL |
待測物 | 樣品20 μL | 標(biāo)準(zhǔn)溶液20 μL | 蒸餾水 20 μL |
孔板混勻儀中震蕩1 min，37°C下孵育15 min。 | |||
反應(yīng)終止液 | 80 μL | 80 μL | 80 μL |
孔板混勻儀中震蕩1 min，使用酶標(biāo)儀測量405 nm處吸光度 | |||
◆數(shù)據(jù)
加標(biāo)回收測試
ALP的加標(biāo)回收測試，將已知含量的標(biāo)準(zhǔn)品加標(biāo)到人、小鼠、大鼠樣品中，n=2。
● 人血清樣品
添加量(mmol/L) | 平均值(mmol/L) | 回收量(mmol/L) | 回收率（%） |
－ | 0.429 | － | － |
0.097 | 0.527 | 0.098 | 101 |
0.197 | 0.587 | 0.158 | 80.2 |
0.297 | 0.672 | 0.243 | 81.8 |
0.507 | 0.866 | 0.437 | 86.2 |
● 小鼠血清樣品
添加量(mmol/L) | 平均值(mmol/L) | 回收量(mmol/L) | 回收率（%） |
－ | 0.284 | － | － |
0.060 | 0.343 | 0.059 | 98.3 |
0.127 | 0.399 | 0.115 | 90.6 |
0.251 | 0.507 | 0.223 | 88.8 |
0.500 | 0.753 | 0.469 | 93.8 |
● 大鼠血清樣品
添加量(mmol/L) | 平均值(mmol/L) | 回收量(mmol/L) | 回收率（%） |
－ | 0.374 | － | － |
0.060 | 0.439 | 0.065 | 108.3 |
0.127 | 0.483 | 0.109 | 85.8 |
0.251 | 0.598 | 0.224 | 89.2 |
0.500 | 0.855 | 0.481 | 96.2 |
稀釋線性度測試
使用隨附的緩沖液制備樣品，使其處于檢測范圍內(nèi)，用緩沖液連續(xù)梯度稀釋4次，并檢測結(jié)果。
● 人血清樣品
● 小鼠血清樣品
● 大鼠血清樣品
樣品檢測案例
● 人樣品
樣品 | 檢測值 (mean) | SD | CV (%) |
混合血清，男性 | 0.556 | 0.003 | 0.5 |
混合血漿(EDTA)，男性 | 0.07 | 0.001 | 1.2 |
※抗凝固劑的EDTA會產(chǎn)生負(fù)誤差，所以請不要使用。
● 小鼠樣品：CD-1(ICR)、雄性、血清
樣品 | 檢測值 (mean) | SD | CV (%) |
No.one | 0.31 | 0.013 | 4.2 |
No.2 | 0.453 | 0.001 | 0.2 |
No.3 | 0.495 | 0.015 | 3 |
No.4 | 0.442 | 0.013 | 2.9 |
No.5 | 0.373 | 0.002 | 0.5 |
樣品 | 檢測值(mean) | SD | CV (%) |
No.one | 0.538 | 0.005 | 1 |
No.2 | 0.441 | 0.01 | 2.2 |
No.3 | 0.357 | 0 | 0 |
No.4 | 0.46 | 0.002 | 0.5 |
No.5 | 0.301 | 0.011 | 3.6 |
單位：mmol/L, n=2
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| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 297-93501 | LabAssay™ ALP LabAssay™ jian性磷酸酶檢測試劑盒 | 500 tests | for Cellbiology | - |
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